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PRODUCTS CENTERCyvita MSC細胞凍存液是一種即用型無血清細胞凍存液,采用化學成分明確的無動物源配方,含10%DMSO及多種細胞營養成分,可顯著提高細胞凍存復蘇存活率。
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產品描述
Cyvita MSC細胞凍存液是一種即用型無血清細胞凍存液,采用化學成分明確的無動物源配方,含10%DMSO及多種細胞營養成分,可顯著提高細胞凍存復蘇存活率。該產品對各種類型的間充質干細胞(MSC)具有非常好的效果,同時適用于多種動物細胞系(如293T、CHO)、免疫細胞(如NK、T、THP1)及其他類型干細胞(如iPSC)的凍存,具有安全性高(無血清污染風險)、凍存效果穩定、操作簡便等特點,支持-80℃短期儲存(6個月)及非程序化凍存,是替代傳統血清凍存液的理想選擇。
訂購信息
產品名稱 | 貨號 | 規格 |
Cyvita MSC細胞凍存液 | AC05L225 | 100 mL |
運輸與保存
常溫運輸。4℃保存,有效期18個月。
使用方法
細胞凍存步驟(如圖1):
1. 使用常規方法收集對數期的貼壁細胞或懸浮細胞,并計數,確認所需凍存的細胞數量。
2. 將即凍存細胞收集于離心管中,1000 rpm 離心 5 min左右,收集細胞沉淀,并棄掉上清液。
3. 加入適量PBS重懸細胞沉淀,1000 rpm 離心 5 min左右,收集細胞沉淀,并棄掉上清液。注意:清 洗步驟,可清洗掉殘留消化液等。
4. 加入適量的凍存液至離心管中,最后的細胞保存濃度為 1×106至 5×106/mL,輕柔混勻細胞,形成細胞混合液。
5. 將細胞混合液按 1~1.5 mL 每管分裝于凍存管中。
6. 將凍存管直接置于 -80℃ 保存,如需長期凍存,第二天轉移至液氮里保存。
圖1
細胞復蘇步驟(如圖2):
1. 先準備體積為凍存液體積9倍的培養基,預溫至室溫或37℃。
2. 從-80℃取出凍存細胞,立即放入37℃ 水浴鍋快速解凍,期間不斷搖晃。待剩余1粒米大小的冰塊時,迅速移出水浴。
3. 用 75% 酒精擦拭凍存管管壁,將細胞懸液轉移至15 ml離心管。
4. 按1:9比例加入預溫(室溫或37℃)的新鮮培養基,混勻,1000 rpm,5 min離心,棄上清,獲取細胞沉淀。注:稀釋DMSO,防止溫度上升后DMSO產生的細胞毒性;稀釋后離心棄上清,殘留的DMSO更少
5. 加入適量預溫的新鮮細胞培養基,輕柔混勻,并將混合液轉移至培養容器,觀察細胞狀態正常后,進行后續細胞培養工作。
圖2
注意事項
1. 本產品僅限于科學實驗研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領域。
2. 細胞在加入凍存液分裝后,應減少在外存放時間,盡快移入到 -80℃ 超低溫冰箱。
3. 對一些難凍存細胞進行凍存時,建議在使用前對所凍存的胞進行1周以上的試驗性細胞冷凍保存測試,摸索好凍存條件和確認性能后再進行正式凍存。
4. 本產品含有10% DMSO,部分對 DMSO 敏感的細胞,建議對其進行至少1周的本產品試驗性的細胞凍存培養測試,摸索好凍存條件和確認性能后再正式凍存。
5. 細胞復蘇時,取出的凍存細胞,應立即放在37℃水浴輕搖,接近融化時取出,避免懸液升溫產生DMSO毒性,迅速解凍有助于提高復蘇效率。
6. 建議復蘇操作將復蘇懸液1:9稀釋后離心收集,優點:稀釋DMSO,防止溫度上升后DMSO產生的細胞毒性;稀釋后離心棄上清,殘留的DMSO更少。
7. 對于較為脆弱或珍貴的細胞,建議在-80°C的存放過夜后,應轉移至液氮罐中長期保存。
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